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        詳細分析組織細胞固定液的使用方法

        發布日期:2021-12-21           信息來源:鹽城溢之源生物科技有限公司

        組織經一系列的處理后,就必須進行固定,當然有的組織是先固定,再進行處理,然后再固定。固定的作用,從組織學的角度其簡單的定義是,保持細胞、組織的固有形態和結構,使之盡量保持細胞、組織的固有形態和結構,而從免疫組化技術的角度,固定的作用不僅是使細胞內蛋白質凝固,盡量減少或終止外源性酶和內源性酶的反應;防止細胞的自溶,以免使抗原擴散至組織間質;以保持組織的固有形態和結構;更重要的是保持組織或細胞的抗原性,不但要使抗原不導致失活,而且不使抗原發生彌散的現象,才能在免疫組化染色時,不產生過深的背景,影響對陽性物的判斷。

        組織細胞固定液的使用說明:
        1、對于細胞樣品,去除培養液后,按照每六孔板一個孔加入1毫升固定液的比例,加入 4%多聚甲醛固定液。對于細胞涂片等其它細胞樣品,加入固定液的量以充分蓋住樣品為準。通常室溫固定10-20分鐘即可,但固定較長時間,例如1-2小時也是可以的。后續需使用適當的洗滌液充分洗滌以去除殘留的多聚甲醛。
        2、對組織切片,加入4%多聚甲醛固定液量以充分覆蓋切片為準,或使用染色架進行固定。通常室溫固定10-20分鐘即可完成固定,但切片較厚時可以固定較長時間,例如1-2 小時。后續需使用適當的洗滌液充分洗滌以去除殘留的多聚甲醛。
        3、對于組織塊樣品,浸泡入4%多聚甲醛固定液中,室溫或4℃浸泡固定2-24小時。建議不超過8小時,除非組織塊特別大,難以滲透。固定完成后,放入裝有蒸餾水的離心管中清洗,每15-30分鐘換一次,共6-8次,建議在搖床進行,或用流水沖洗1-2小時。隨后梯度脫水,進行包埋。如果暫時不包埋可放入70-75%的酒精中保存。

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